八月瓜首页 > 专利查询 > >正文

口服活性雄激素

基本信息

  • 申请号 CN00810310.0 
  • 公开号 CN1360589A 
  • 申请日 2000/07/10 
  • 公开日 2002/07/24 
  • 申请人 阿克佐诺贝尔公司  
  • 优先权日期  
  • 发明人 H·J·J·鲁泽 D·雷森 J·范德罗  
  • 主分类号  
  • 申请人地址 荷兰阿纳姆 
  • 分类号  
  • 专利代理机构 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 
  • 当前专利状态 发明专利申请公布 
  • 代理人 程金山 
  • 有效性 发明公开 
  • 法律状态
  •  

摘要

本发明涉及的新的口服活性的雄激素是7α取代的Δ展开

权利要求书


1.满足结构式I的化合物: 其中 R1是O,(H,H),(H,OR),NOR,R是氢,(C1-6)烷基,或(C1-6)酰基; R2选自(C2-4)烷基,(C2-4)链烯基,或(C2-4)炔基,各自任选地被卤原子 取代;或者 R2是环丙基,或环丙烯基,各自任选地被(C1-2)烷基或卤原子取代; R3是氢,(C1-2)烷基,或乙烯基; R4是(C1-2)烷基; R5是氢或(C1-15)酰基; 并且虚线表示任选的键。

2.根据权利要求1的化合物,特征在于R2选自乙基,乙烯基,乙炔基, 丙基,1-丙烯基,2-丙烯基,1-丙炔基,1,2-丙二烯基和环丙基。

3.根据权利要求2的化合物,特征在于R2是C2

4.一种药物组合物,含有药用载体并且含有作为药物活性成分的 满足结构式I的甾族化合物: 其中 R1是O,(H,H),(H,OR),NOR,R是氢,(C1-6)烷基,或(C1-6)酰基; R2选自(C2-4)烷基,(C2-4)链烯基,或(C2-4)炔烃基,各自任选地被卤原 子取代;或者 R2是环丙基,或环丙烯基,各自任选地被(C1-2)烷基或卤原子取代; R3是氢,(C1-2)烷基,或乙烯基; R4是(C1-2)烷基; R5是氢或(C1-15)酰基; 并且虚线表示任选的键。

5.根据权利要求4的药物制剂,特征在于该甾族化合物的R2选自乙 基,乙烯基,乙炔基,丙基,1-丙烯基,2-丙烯基,1-丙炔基,1,2-丙二烯 基和环丙基。

6.根据权利要求4的药物制剂,特征在于该甾族化合物是 (7α,17β)-7-乙基-17-羟基雌甾-4,14-二烯-3-酮或(7α,17β)-7-乙烯 基-17-羟基雌甾-4,14-二烯-3-酮。

7.根据权利要求5-6任一项的药物制剂,特征在于其适合口服给 药。

8.满足式I的化合物在制备用于治疗雄激素不足的药物中的用途。

9.用于雄性节育的包括用来施用孕激素的工具和用来施用雄激素 的工具的试剂盒,特征在于后一种工具是根据权利要求4-7任一项的 药物制剂。
展开

说明书

本发明涉及口服活性雄激素领域,更具体地说涉及19-去甲睾酮Δ 14衍生物。
睾酮衍生物是已知的。
就给药方法而言,作为药物睾酮本身,该天 然雄性激素具有很多已知的缺点。
其具有持续时间短的活性,在常规的 药学可接受介质中不溶解,并且不是非常有效。
更有效的二氢睾酮(睾 酮的5α-还原形式)被认为对健康有害,特别是对前列腺。
更有效的雄激素是在FR4521M和US5342834中公开的7α-甲基 -19-去甲睾酮(MANT)。
但是MANT的一个重要的缺点是其不好的药物动 力学性质,这限制其作为口服活性雄激素的用途。
通常在药物制剂领域,人们一般期望药物具有口服活性。
口服剂量 形式,例如固体剂量形式,例如片剂和胶囊,是最普遍被接受的给药形 式。
在雄激素领域,特别期望口服给药与象男性节育这样的用途结合起 来。
因为在女性节育领域“口服避孕药”几乎成了可靠避孕的同义词, 但是事实表明在雄性节育领域也期望口服活性以使提供男性“口服避 孕药”。
在该领域中占据特殊地位的雄激素被称之为“Segaloff甾族化合 物”,其是如在MENT中具有一个7α-甲基,并且在14和15碳原子之 间具有双键(Δ14)的19-去甲睾酮衍生物。
这种特殊地位是由于其长期 以来被认为是已知的最有效的口服雄激素这一事实。
参 见,int.al.Avery等,甾族化合物(Steroids)55,59(1990)。
从 GB1341601也已知该化合物和7α-H类似物。
 除该领域中占据特殊地位以外,“Segaloff甾族化合物”还没有 发现实际应用,这可能由于其对于临床应用有几个缺点。
例如,使用19- 去甲睾酮,代谢稳定性是一个问题。
因此,从GB1341601已知这些化合 物易于被肝脏17β-羟基甾族化合物脱氢酶代谢灭活。
对该问题的常 规答案,认为17α位的烷基的引入是例如有限活性这样的令人不满意 的结果的原因。
可以提到几篇非常早的文献,其作为与包括19-去甲睾酮衍生物的 这一组甾族化合物相关的进一步的背景技术。
这些参考文献没有一篇 教导口服活性雄激素。
这样,在1966年公开的FR1432561中,象具有C-7位烷基取代基的 MENT这样的19-去甲睾酮被用作在5和6碳原子之间具有双键的激素 物质的起始物。
没有公开除了甲基以外的烷基。
BE861224涉及宽范围17-羟基甾族化合物的所有的可能的酯。
1976 年以来公开的出版物具体教导了一些酯预期具有延长的甾族化合物活 性。
在公开的这些甾族化合物中有雌激素,抗雌激素,雄激素和合成代 谢产物。
给出了各种位置上很多可能的取代基,其中包括C-7位是甲基 和乙基。
化学文摘(Chemical Abstracts)110:95601y(1989)是关于7-烯丙 基-19-去甲睾酮的17-羟基乙酸酯作为7-烯丙基雌二醇合成中的中间 体。
EP159739教导了雌甾烷系列免疫调节物质,特别包括6或7位具有 烷基取代基的Δ4和Δ5(10)-雌甾烯衍生物。
所述烷基取代基一般是甲基。
DE2043404涉及具有抗激素活性的7β-甾族化合物。
烷基取代基大 多是甲基,但是也公开过乙基和丙基。
在7β-乙基-19-去甲睾酮(其是 DE2043404中公开的一个化合物)的合成中,也生成了7α-异构体。
其没 有教导利用该异构体做任何应用,并且该文献也没有教导从甲基部分 区别乙基或丙基取代基。
Solo等,甾族化合物(Steroids)40,603-614(1990)也是背景技术 参考文献。
其中公开了睾酮的各种7α-烷基衍生物。
本发明的一个目的是提供口服活性雄激素,其与Segaloff甾族化 合物相比改进之处是它们更好地适合临床应用,并且特别具有足够的 口服活性和代谢稳定性。
根据本发明,提供满足下面通式I的化合物 其中 R1是O,(H,H),(H,OR),NOR,R是氢,(C1-6)烷基,或(C1-6)酰基; R2选自(C2-4)烷基,(C2-4)链烯基,或(C2-4)炔烃基,各自任选地被卤原 子取代;或者 R2是环丙基,或环丙烯基,各自任选地被(C1-2)烷基或卤原子取代; R3是氢,(C1-2)烷基,或乙烯基; R4是(C1-2)烷基; R5是氢或(C1-15)酰基; 并且虚线表示任选的键。
本发明包括上述甾族化合物的药学可接受盐或酯,前药和母体。
在式I的定义中使用的术语(C1-6)烷基指具有1-6个碳原子的直链 或支链烷基,象甲基,乙基,丙基,异丙基,丁基,异丁基,叔丁基,戊基和 己基。
同样,术语(C2-4)烷基指具有2-4个碳原子的直链或支链烷基, 术语(C1-2)烷基指具有1-2个碳原子的烷基。
术语(C2-4)链烯基指至少具有一个双键并且具有2-4个碳原子的直 链或支链链烯基。
优选的链烯基具有2-3个碳原子,例如乙烯基和丙烯 基。
术语(C2-4)炔烃基指至少具有一个三键并且具有2-4个碳原子的直 链或支链炔烃基。
优选的炔烃基具有2-3个碳原子,例如乙炔基和丙炔 基。
术语(C1-6)酰基指从具有1-6个碳原子的羧酸衍生的酰基,象甲酰 基,乙酰基,丙酰基,丁酰基,2-甲基丙酰基,戊酰基,新戊酰基和己酰 基。
同样,术语(C1-15)酰基指从具有1-15个碳原子的羧酸衍生的酰基。
也包括在(C1-6)酰基或(C1-15)酰基定义内的是从二元羧酸衍生的酰基, 例如半-丙二酰基,半-琥珀酰基,半-戊二酰基等等。
优选的是半-琥珀 酰基。
术语卤原子指氟,氯,溴或碘。
当卤原子是烷基上的取代基时,优选 Cl和F。
最优选F。
要理解本发明的7α-取代的Δ14去甲睾酮(nandrolone)衍生物具有 天然构象5α,8β,9α,10β,13β和17β。
本发明的7α-取代的Δ14去甲睾酮衍生物具有天然构型 5α,8β,9α,10β,13β和17β,并且还可以具有一个或多个另外的手性碳 原子。
因此可以以纯的非对映异构体或者作为非对映异构体的混合物 获得化合物。
获得纯的非对映异构体的方法是本领域公知的,例如结晶 或层析。
与上述已知的“Segaloff甾族化合物”区别在于7α取代基的长度 的本发明的化合物令人惊奇地好于所述已知的甾族化合物,并且具有 出人意料的临床应用的优点。
特别表现在令人惊奇地更好的口服活性。
本发明的优选的化合物进一步表现出比Segaloff甾族化合物好得多 的代谢稳定性。
本发明的优选的化合物具有选自乙基,乙烯基,乙炔基,丙基,1-丙 烯基,2-丙烯基,1-丙炔基,1,2-丙二烯基和环丙基的R2
更优选的化合物是其中R1是氧代,R3是氢,R4是甲基,并且虚线表示 Δ4双键的化合物。
最优选的是其中R2是C2,最优选是乙基或乙烯基的那些化合物。
通过普通化学领域,特别是甾族化合物领域公知的各种方法,可以 制备本发明的化合物(参见,例如:Fried,J.等,甾族化合物化学中的 有机反应(Organic Reactions in Steroid Chemistry),第I和II 卷,Van Nostrand Reinhold Company,纽约,1972)。
基本的是向甾族化合物环结构加上饱和的或不饱和的7α-取代基 (任选地被卤原子取代),和引入Δ14双键。
用于制备其中R1是氧代,R2,R3和R4具有上文给出的定义,R5是氢,并且虚线表示Δ4双键的式I的化合 物的方便的起始物是例如通式II的甾-4-烯-3-酮衍生物,其中R3和R4具有上文给出的定义,R6是氧代,(17α-H,17β-OR7),或(17α-C≡CH, 17β-OR7),其中R7是羟基保护基,例如酰基,象乙酰基,苯甲酰基或新戊 酰基,烷氧基烷基,象乙氧基乙基或四氢吡喃基(THP),或甲硅烷基,例 如三甲基甲硅烷基或叔丁基二甲基甲硅烷基,它们的合成是文献中已 知的,或者可以使用标准方法制备。
可能的合成途径如下。
通过使用标准方法,例如通过转化为3-乙酰 基氧基-或3-烷氧基甾-3,5-二烯衍生物,接着与2,3,5,6-四氯-1,4- 苯并醌反应能够将式II的甾-4-烯-3-酮衍生物转化为相应的甾-4,6- 二烯-3-酮衍生物[Solyom,S.等,甾族化合物 (Steroids)35,361(1980)]。
然后通过共轭加成(1,6-加成)引入7α- 取代基或者其母体。
对于该反应,本领域已知几种方法,其中包括: 1)-有机铜试剂的共轭加成[关于有机铜试剂的共轭加成,参见 Lipshutz,B.H.等,有机反应(Org.Reaction)41,p.135,Wiley,纽 约,1992]。
2)-过渡金属介导的(TiCl4,AlCl3,ZrCl4,等)有机硅化合物的反应 [一般的1,6-加成,参见例如Nickisch,K等,四面体快报(Tetrahedron Lett.)29,1533(1988)]。
3)-丙二酸二烷基酯,2,2-二甲基-1,3-二噁烷-4,6-二酮或者氰 基乙酸烷基酯的碱-催化的共轭加成[参见例如Cruz,R. 等,Austr.J.Chem.35,451(1982)]。
4)-合适的氰化物(MC≡N,M是Li,Na,K,AlR2,SiR3等)的共轭加 成。
一般情况下,这些方法主要地或大量地产生7α-异构体。
因此可以将这样获得的7α-取代的甾-4-烯-3-酮芳构化为3-羟基- 甾-1,3,5(10)-三烯[Yuan,S.S.等,甾族化合物 (Steroids)39,279(1982)],其然后甲基化为3-甲氧基衍生物。
也可以 直接实现向3-甲氧基甾-1,3,5(10)-三烯的转化[Brito,M.等,合成通 讯(Synth.Commun)26,623(1996)]。
当R6是(17α-H,17β-OR7)时,17-羟 基被保护并且被氧化产生3-甲氧基甾-1,3,5(10)-三烯-17-酮衍生物 [对于氧化反应,参见:Hudlichy,M.,有机化学中的氧化作用 (Oxidation in Organic Chemistry),ACS Monograph 186,华盛 顿,DC,1990]。
当R6是(17α-C≡CH,17β-OR7)时,17-羟基也是被保护并 且17α-乙炔基-17β-羟基衍生物被转化为17-酮,例如通过在C盐上与 碳酸银反应[Rao,P.N.等,甾族化合物(Steroids)59,621(1994)]或 者本领域已知的其它方法。
在两种情况下,向17-酮的转化也可以在芳 构化之前完成。
这样获得的3-甲氧基甾-1,3,5(10)-三烯-17-酮衍生 物可以直接溴化,例如通过在苯/甲醇中与溴化铜(II)反应 [Segaloff,A.等,甾族化合物(Steroids)22,99(1973)]。
3-甲氧基甾 -1,3,5(10)-三烯-17-酮衍生物也可以被转化为乙酸烯醇酯,然后用溴 处理[Johnson,W.S.等,美国化学学会杂志 (J.Am.Chem.Soc.)79,2005(1957)],或者烯醇甲硅烷基醚接着与例如 N-溴代琥珀酰亚胺反应[Heathcock,C.H.等,美国化学学会杂志 (J.Amer.Chem.Soc.)104,6081(1982)]。
16α-溴代酮的脱氢溴化作用, 例如通过与LiBr/Li2CO3/DMF反应[Bull,J.R.等,J.Chem.Soc.,Perkin Trans.I,241(1990)],通常产生(14β)-3-甲氧基甾-1,3,5(10),15-四 烯-17-酮和3-甲氧基甾-1,3,5(10),14-四烯-17-酮衍生物。
通过使用 氢硼化钠,氢化铝锂或其它还原剂将后者还原为相应的(17β)-3-甲氧 基甾-1,3,5(10),14-四烯-17-醇之后可以将它们分离。
7α-取代的3-甲氧基甾-1,3,5(10)三烯-17-酮衍生物也可以被转 化为相应的环醛缩1,2-乙二醇,其然后被溴化得到(16α)-16-溴-3-甲 氧基甾-1,3,5(10)三烯-17-酮环醛缩1,2-乙二醇衍生物。
可以使用 吡啶鎓三溴化物,苯基三甲基铵三溴化物或者本领域公知的其它溴化 剂完成相互作用[Rasmusson,G.H.等,甾族化合物 (Steroids)22,107(1973)]。
该16α-溴代化合物通过在二甲苯或二甲 亚砜这与碱例如叔丁醇钾反应而脱氢溴化,得到Δ15化合物[Johnson, 上文;Poirier,D.等,四面体(Tetrahedron)47,7751(1991)]。
乙缩醛 的温和水解,例如,通过在丙酮和水的混合物中用对甲苯磺酸处理 [Johnson,上文],产生3-甲氧基甾-1,3,5(10),15-四烯-17-酮衍生物, 其然后通过与乙酸酐,乙酸异丙烯酯或者其它酰化试剂酸催化反应而 被转化为乙酸3-甲氧基甾-1,3,5(10),14,16-五烯-17-酯[Rasmusson, 上文;Bull,上文]。
用氢硼化钠或者其它还原剂处理该乙酸酯 [Rasmusson,上文]导致生成(17β)-3-甲氧基甾-1,3,5(10),14-四烯 -17-醇衍生物。
任选地,3-甲氧基甾-1,3,5(10),15-四烯-17-酮环醛 缩1,2-乙二醇可以通过酸催化的异构化作用转化为相应的Δ14衍生物 [Ponsold,K.等,J.Prakt.Chem.323,819(1981)]。
乙缩醛的去除和17- 氧代的还原产生(17β)-3-甲氧基甾-1,3,5(10),14-四烯-17-醇衍生 物。
3-甲氧基甾-1,3,5(10),15-四烯-17-酮可以经异构化作用得到 (14β)-3-甲氧基甾-1,3,5(10),15-四烯-17-酮和3-甲氧基甾 -1,3,5(10),14-四烯-17-酮衍生物,其可以如上所述进行处理。
引入Δ15双键的其它方法包括:3-甲氧基甾-1,3,5(10)-三烯-17- 酮衍生物转化为乙酸烯醇酯并且与钯(II)盐反应[Takahashi,T.等, 四面体(Tetrahedron)41,5747(1985)],或者该烯醇酯与2-吡啶亚磺 酸甲酯反应[Dinne,P.等,甾族化合物(Steroids)62,674(1997)]。
这样得到的7α-取代的(17β)-3-甲氧基甾(gona)-1,3,5(10),14- 四烯-17-醇衍生物的Birch还原[Caine,D.,有机反应 (Org.Reactions)23,p.1,Wiley,纽约,1976]和得到的(17β)-3-甲氧 基甾-1,5(10),14-三烯-17-醇衍生物的水解然后提供了本发明的7α- 取代的(17β)-17-羟基甾-4,14-二烯-3-酮衍生物。
在其中7α-取代基 是从其母体得出的情况下(即不饱和的7α-取代基,丙二酸酯片段或者 氰基,参见上文),能够使用标准方法完成的该项操作,经常一定会与Δ 14双键的引入同时发生。
引入7α-取代基和引入Δ14双键需要精确顺序 的反应步骤,包括合成策略中的通用方法涉及的Birch还原和将得到 的甾-2,5(10)-二烯转化为本发明的7α-取代的(17β)-17-羟基甾 -4,14-二烯-3-酮衍生物(参见实施例4和5)。
通过使用本领域公知的方法,由其中R1是氧代的式I的化合物获得 其中R1是(H,H),(H,OR),NOR,R是氢,(C1-6)烷基,(C1-6)酰基的本发明 的化合物。
通过使用本领域公知的方法,由其中R5是氢的式I的化合物获得其。
中R5是(C1-15)酰基的本发明的化合物。
由Birch还原后获得的Δ2,5(10)二烯制备其中虚线是Δ5(10)双键的本 发明的化合物。
或者,它们可以通过异构化作用从Δ4衍生物制备。
从 Δ4衍生物制备本发明的5α-还原的化合物。
下面参照下面的实施例进一步解释本发明。
实施例1 (7α,17β)-7-乙基-17-羟基雌-4,14-二烯-3-酮(a)和(7α,17β)-7- 乙基-17-羟基雌-5(10),14-二烯-3-酮(b) i)在5分钟内向(17α)-17-羟基-19-去甲孕甾-4,6-二烯-20-炔 -3-酮[Syntex S.A.,GB935116(1958);18.0克]在二氯甲烷(300毫升) 和吡啶(25毫升)的混合物中的悬浮液加入氯三甲基硅烷(19毫升),冷 却到0℃。
0℃下搅拌2小时之后将该反应混合物倒入饱和的碳酸氢钠 水溶液中。
将产物萃取到二氯甲烷中;合并的有机相用水和盐水洗涤, 硫酸钠干燥并且减压浓缩,得到(17α)-17-[(三甲基甲硅烷基)氧 基]-19-去甲孕甾-4,6-二烯-20-炔-3-酮(22.3克)。
该产物不用进一 步纯化就在下面的步骤中使用。
ii)将锂(5.0克)和无水二乙醚(200毫升)的混合物冷却到-30 ℃。
将得到的乙基锂溶液转移给无水四氢呋喃(140毫升)中碘化铜 (30.6克)的悬浮液之后滴加溴乙烷(26.9毫升),并且冷却到-30℃。
室 温下将得到的铜酸盐溶液搅拌45分钟滴加无水四氢呋喃(160毫升)中 前一步骤获得的产物(20.0克)的溶液。
45分钟之后,在-25℃下搅拌, 加入氯三甲基硅烷(20毫升)并且又继续搅拌30分钟。
将反应混合物 倒入饱和的氯化铵水溶液中并且将产物萃取到乙酸乙酯中。
合并的有 机相用饱和的氯化铵水溶液和盐水洗涤,硫酸钠干燥并且减压浓缩, 得到(7α,17α)-7-乙基-3,17-二[(三甲基甲硅烷基)氧基]-19-去甲孕 甾-3,5-二烯-20-炔(29.5克)。
该产物不用进一步纯化就在下面的步 骤中使用。
iii)用盐酸(2.3M,20毫升)处理丙酮(400毫升)中前一步骤获得 的产物(29.5克)的溶液。
室温下搅拌1.5小时之后用饱和的碳酸氢钠 水溶液中和反应混合物。
减压下去除丙酮并且将产物萃取到乙酸乙酯 中。
合并的有机相用盐水洗涤,硫酸钠干燥并且减压浓缩,得到 (7α,17α)-7-乙基-17-羟基-19-去甲孕甾-4-烯-20-炔-3-酮(19.5 克)。
该产物不用进一步纯化就在下面的步骤中使用。
iv)向甲醇(1200毫升)中代卡利特(240克)的悬浮液滴加盐酸 (6M,240毫升)。
室温下搅拌20分钟之后,过滤收集代卡利特并且用水 洗涤直到中性。
然后,将其悬浮于水(960毫升)。
剧烈搅拌下,加入硝 酸铜(II)三水合物(145克),接着小心加入水(360毫升)中碳酸钠 (72.2克)溶液。
搅拌30分钟后,过滤收集产物并且用水洗涤直到中性。
在80℃下减压下干燥产物,得到代卡利特上的碳酸铜(II)(310克)。
通 过使用迪安-斯达克榻分水器,将甲苯(330毫升)中iii中获得的产物 (19.5克)和代卡利特上的碳酸铜(II)(70克)的混合物在回流温度下 加热9小时去除水。
过滤反应混合物,用乙酸乙酯充分洗涤残余物,并 且减压浓缩滤液。
柱层析得到(7α)-7-乙基雌甾-4-烯-3,17-二酮 (9.14克)。
v)室温下将乙腈(285毫升)中前一步骤获得的产物(9.14克), 溴化铜(II)(13.6克)和溴化锂(2.64克)的溶液搅拌4小时。
将反应混 合物倒入水中并且将产物萃取到乙酸乙酯中。
合并的有机相用饱和的 氯化铵水溶液和盐水洗涤,硫酸钠干燥并且减压浓缩,柱层析得到 (7α)-7-乙基-3-羟基雌甾-1,3,5(10)-三烯-17-酮(6.54克)。
vi)室温下将前一步骤获得的产物(6.54克),无水碳酸钾(18.6 克),碘甲烷(5.6毫升)和无水二甲基甲酰胺(22毫升)的混合物搅拌 3.5小时。
将反应混合物倒入水中并且将产物萃取到乙酸乙酯中。
合 并的有机相用水,饱和的氯化铵水溶液和盐水洗涤,硫酸钠干燥并且 减压浓缩,得到(7α)-7-乙基-3-甲氧基雌甾-1,3,5(10)-三烯-17-酮 (6.77克)。
该产物不用进一步纯化就在下面的步骤中使用。
vii)将无水四氢呋喃(70毫升)中二异丙基胺(6.15毫升)的溶液 冷却到-30℃。
滴加n-BuLi(1.6M己烷溶液,27.5毫升),并且继续搅拌 30分钟。
将反应混合物冷却到-50℃并且滴加无水四氢呋喃(100毫升) 中前一步骤获得的产物(6.95克)溶液。
继续搅拌1小时。
冷却到-60 ℃后,加入氯三甲基硅烷(11.1毫升)。
将混合物搅拌20分钟之后用无 水吡啶(31毫升)中苯基三甲基铵三溴化物(10.0克)的溶液处理。
-60 ℃下搅拌1小时之后,将混合物倒入水中并且将产物萃取到乙酸乙酯 中。
合并的有机相用饱和的碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤,硫酸钠干燥 并且减压浓缩,柱层析得到(7α,16α)-16-溴-7-乙基-3-甲氧基雌甾 -1,3,5(10)-三烯-17-酮(8.75克)。
viii)将无水二甲基甲酰胺(77毫升)中前一步骤获得的产物 (8.75克),溴化锂(12.7克)和碳酸锂(10.9克)和无水二甲基甲酰胺 (22毫升)的混合物回流加热3.25小时。
冷却后,将反应混合物倒入水 中并且将产物萃取到乙酸乙酯中。
合并的有机相用水和盐水洗涤,硫 酸钠干燥并且减压浓缩,柱层析得到(7α)-7-乙基-3-甲氧基雌甾 -1,3,5(10),14-四烯-17-酮(4.31克)和(7α,14β)-7-乙基-3-甲氧基 雌甾-1,3,5(10),15-四烯-17-酮(1.0克)。
ix)向二氯甲烷(12毫升)中(7α)-7-乙基-3-甲氧基雌甾 -1,3,5(10),14-四烯-17-酮(4.31克)的溶液滴加甲醇(50毫升)中氢 硼化钠(0.21克)和氢氧化钠(0.44克)的溶液,冷却到0℃。
将反应混 合物搅拌1.5小时,用丙酮(4毫升)中止反应,然后倒入饱和的氯化铵 水溶液。
产物萃取到乙酸乙酯中;合并的有机相用盐水洗涤,硫酸钠干 燥并且减压浓缩,得到(7α,17β)-7-乙基-3-甲氧基雌甾 -1,3,5(10),14-四烯-17-醇(4.28克)。
该产物不用进一步纯化就在 下面的步骤中使用。
x)向回流的液氨(98毫升)中的锂(2.12克)溶液加入无水四氢 呋喃(24毫升)中前一步骤获得的醇(1.5克)。
-35℃下搅拌4.5小时之 后在30分钟内加入2-丙醇。
使氨蒸发。
加入水并且将产物萃取到乙 酸乙酯中。
合并的有机相用盐水洗涤,硫酸钠干燥并且减压浓缩,得到 (7α,17β)-7-乙基-3-甲氧基雌甾-2,5(10),14-三烯-17-醇(1.65 克)。
该产物不用进一步纯化就在下面的步骤中使用。
xi)室温下将二氧化硅(5.2克),饱和的草酸(0.52毫升)水溶液 和二氯甲烷(14毫升)的混合物搅拌10分钟。
加入二氯甲烷(5毫升) 中前一步骤得到的产物(1.6克)的溶液,并且继续搅拌1.5小时。
加入 固体碳酸氢钠并且继续搅拌10分钟。
过滤混合物并且减压浓缩滤液。
粗产物经柱层析,得到(7α,17β)-7-乙基-17-羟基雌甾-5(10),14-二 烯-3-酮(1.03克)。
1H-NMR(CDCl3)δ5.04(bs,1H),4.03(t,1H, J=8.4Hz),2.76(bs,2H),0.98(s,3H),0.93(t,3H,J=6.6Hz)。
xii)根据类似于iii描述的方法,将前一步骤获得的产物(0.45克) 转化为(7α,17β)-7-乙基-17-羟基雌甾-4,14-二烯-3-酮(0.24克)。
M.p.102-105℃。
实施例2 (7α,17β)-7-乙烯基-17-羟基雌甾-4,14-二烯-3-酮 i)将无水四氢呋喃(167毫升)中(17β)-17-(乙酰氧基)雌甾 -4,6-二烯-3-酮[Syntex,DE1143199(1963);50.0克],锂硫代苯酚盐 (1.0M四氢呋喃溶液,16毫升),溴化铜(I)-二甲基硫化物复合物(3.18 克)和溴化锂(1.38克)的溶液冷却到-15℃。
滴加乙烯基氯化镁(2M四 氢呋喃溶液,159毫升)(T≤15℃)并且继续搅拌30分钟。
滴加饱和的 氯化铵水溶液并且又继续搅拌15分钟。
反应混合物经代卡利特过滤, 并且将产物萃取到乙酸乙酯中。
合并的有机相减压浓缩,残余物溶解于 丙酮(1000毫升)。
加入盐酸(4M,100毫升),并且将混合物在室温下 搅拌30分钟。
加入饱和的碳酸氢钠水溶液并且减压去除丙酮。
将产物 萃取到乙酸乙酯中;合并的有机相用盐水洗涤,硫酸钠干燥,减压浓缩, 得到(7α,17β)-17-(乙酰氧基)-7-乙烯基雌甾-4-烯-3-酮和 (7β,17β)-17-(乙酰氧基)-7-乙烯基雌甾-4-烯-3-酮(57.3克,比例 85∶15)。
该产物不用进一步纯化就在下面的步骤中使用。
ii)向四氢呋喃(833毫升),甲醇(738毫升)和水(238毫升)中前 一步骤获得的产物(57.3克)的溶液分批加入氢氧化钾(26.7克)。
室温 下将反应混合物搅拌45分钟之后用浓盐酸(20毫升)中和。
减压下部 分去除四氢呋喃和甲醇,并且将产物萃取到乙酸乙酯中。
合并的有机相 用水和盐水洗涤,硫酸钠干燥并且减压浓缩,柱层析得到 (7α,17β)-7-乙烯基-17-羟基雌甾-4-烯-3-酮(36.7克)。
iii)将前一步骤获得的产物(66.2克),原甲酸三甲酯(80毫升), 溴化铜(II)(65.2克)和甲醇(1788毫升)的混合物在回流下加热50分 钟。
冷却后,过滤反应混合物。
减压浓缩滤液并且残余物溶解于乙酸乙 酯。
乙酸乙酯溶液用饱和的碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤,硫酸钠干燥 并且减压浓缩,柱层析得到(7α,17β)-7-乙烯基-3-甲氧基雌甾 -1,3,5(10)-三烯-17-醇(42.9克)。
iv)向丙酮(1080毫升)中前一步骤获得的产物(41.1克)和4-甲 基吗啉N-氧化物(46.2克)的溶液加入四丙基铵过镣酸盐(2.76克)。
室温下搅拌1小时后,反应混合物经代卡利特和二氧化硅过滤。
将滤液 减压浓缩,柱层析得到(7α)-7-乙烯基-3-甲氧基雌甾-1,3,5(10)-三 烯-17-酮(38.1克)。
v)向乙二醇(108毫升)和原甲酸三乙酯的混合物中前一步骤获 得的产物(36.05克)溶液加入对甲苯磺酸(3.21克)。
反应混合物在室 温下搅拌2小时。
加入水(1800毫升)并且继续搅拌1小时。
产物萃取 到乙酸乙酯中;合并的有机相用饱和的碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤,硫 酸钠干燥,减压浓缩,得到(7α)-7-乙烯基-3-甲氧基雌甾-1,3,5(10)- 三烯-17-酮环醛缩1,2-乙二醇(41.37克)。
该产物不用进一步纯化就 在下面的步骤中使用。
 vi)向无水四氢呋喃(114毫升)中前一步骤获得的产物(21.37克) 溶液分批加入苯基三甲基铵三溴化物(22.60克)。
将反应混合物搅拌 40分钟,然后分批加入苯基三甲基铵三溴化物处理直到反应完全。
搅 拌30分钟后将混合物倒入硫代硫酸钠水溶液(10%)中,并且将产物萃 取到乙酸乙酯中;合并的有机相用饱和的碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤, 硫酸钠干燥,减压浓缩,得到(7α,16α)-16-溴-7-乙烯基-3-甲氧基雌 甾-1,3,5(10)-三烯-17-酮环醛缩1,2-乙二醇(34.91克)。
该产物不 用进一步纯化就在下面的步骤中使用。
vii)用叔丁醇钾(13.5克)处理无水二甲亚砜(178毫升)中前一步 骤获得的产物(34.91克)溶液并且将反应混合物在40℃下搅拌3小时。
分别在30分钟和1小时后再加入另外量的(13.5克)叔丁醇钾。
将混 合物倒入饱和的氯化铵水溶液中,并且将产物萃取到乙酸乙酯中。
合并 的有机相用饱和的氯化铵水溶液和盐水洗涤,硫酸钠干燥,减压浓缩, 柱层析得到(7α)-7-乙烯基-3-甲氧基雌甾-1,3,5(10),15-四烯-17- 酮环醛缩1,2-乙二醇(17.54克)。
viii)用对甲苯磺酸(1.48克)处理丙酮(507毫升)和水(43毫升) 的混合物中前一步骤获得的产物(31.47克)溶液并且将反应混合物在 室温下搅拌2小时。
将混合物倒入饱和的碳酸氢钠水溶液中,并且将产 物萃取到乙酸乙酯中。
合并的有机相用盐水洗涤,硫酸钠干燥,减压浓 缩,柱层析得到(7α)-7-乙烯基-3-甲氧基雌甾-1,3,5(10),15-四烯 -17-酮(23.92克)。
ix)用对甲苯磺酸(13.5克)处理无水甲苯(970毫升)的混合物中 前一步骤获得的产物(23.9克)溶液并且回流下加热15分钟。
冷却后, 将混合物倒入饱和的碳酸氢钠水溶液中,并且将产物萃取到乙酸乙酯 中。
合并的有机相用盐水洗涤,硫酸钠干燥,减压浓缩,柱层析得到 (7α)-7-乙烯基-3-甲氧基雌甾-1,3,5(10),14-四烯-17-酮(14.9克) 和(7α,14β)-7-乙烯基-3-甲氧基雌甾-1,3,5(10),15-四烯-17-酮 (7.32克)。
x)向四氢呋喃(27.8毫升),乙醇(27.8毫升)和水(4.55毫升) 的混合物中前一步骤获得的(7α)-7-乙烯基-3-甲氧基雌甾 -1,3,5(10),14-四烯-17-酮(1.50克)的溶液加入氢硼化钠(1.47 克)。
将反应混合物搅拌50分钟之后倒入水中。
将产物萃取到乙酸乙 酯中。
合并的有机相用水和盐水洗涤,硫酸钠干燥并且浓缩,得到 (7α,17β)-7-乙烯基-3-甲氧基雌甾-1,3,5(10),14-四烯-17-醇 (1.47克)。
该产物不用进一步纯化就在下面的步骤中使用。
xi)向回流的液氨(105毫升)中加入无水四氢呋喃(26毫升)中前 一步骤获得的产物(1.47克)溶液。
加入锂颗粒(0.95克),并且将反应 混合物搅拌1.25小时。
加入无水叔丁醇(9.2毫升),并且将反应混合 物再搅拌30分钟。
加入固体氯化铵并且使氨蒸发。
加入水并且将产物 萃取到乙酸乙酯中。
合并的有机相用饱和的氯化铵水溶液和盐水洗涤, 硫酸钠干燥并且减压浓缩,得到(7α,17β)-7-乙烯基-3-甲氧基雌甾 -2,5(10),14-三烯-17-醇(1.48克)。
该产物不用进一步纯化就在下 面的步骤中使用。
xii)根据类似于实施例iii描述的方法,将前一步骤获得的产物 (1.48克)水解,柱层析和结晶后得到(7α,17β)-7-乙烯基-17-羟基雌 甾-4,14-二烯-3-酮(0.419克)。
M.p.129-136℃。
实施例3 (7α,17β)-17-羟基-7-丙基雌甾-4,14-二烯-3-酮 根据类似于实施例1描述的方法,制备标题化合物。
1H-NMR(CDCl3) δ5.86(bs,1H),5.08(m,1H),4.00(q,1H,J=7.2Hz),1.00(s,3H),0.89 (t,3H,J=6.2Hz)。
实施例4 (7α,17β)-17-羟基-7-(2-丙烯基)雌甾-4,14-二烯-3-酮 i)将无水二乙醚(250毫升)中锂颗粒(含有0.5%钠;5.60克)的 混合物冷却到-30℃。
在45分钟内加入1-溴-3-[[(1,1-二甲基乙基) 二甲基甲硅烷基]氧基]丙烷(101.2克),同时保持温度低于0℃。
加入 溴之后,将反应混合物在20℃下再搅拌45分钟。
在第二个烧瓶中,将 无水四氢呋喃(200毫升)中碘化铜(I)(38.1克)的悬浮液冷却到-30 ℃。
5分钟内加入有机锂化合物的溶液(-20℃≤T≤-10℃),并且又继 续搅拌5分钟。
然后在5分钟内加入无水四氢呋喃(200毫升)中 (17α)-17-[(三甲基甲硅烷基)氧基]-19-去甲孕甾-4,6-二烯-20-炔 -3-酮(实施例1,步骤i;51.6克),并且将反应混合物在-20℃下搅拌1 小时。
将混合物倒入饱和的氯化铵水溶液和浓氨水(9∶1)中,并且将产 物萃取到乙酸乙酯中。
合并的有机相用饱和的碳酸氢钠水溶液和盐水 洗涤,硫酸钠干燥并浓缩。
残余物溶解于丙酮(500毫升)。
加入盐酸 (6M,25毫升),并且将反应混合物在室温下搅拌2小时。
加入饱和的碳 酸氢钠水溶液,并且去除丙酮。
将产物萃取到乙酸乙酯中;合并的有机 相用盐水洗涤,硫酸钠干燥并且浓缩,柱层析得到(7α,17α)-17-羟基 -7-(3-羟基丙基)-19-去甲孕甾-4-烯-20-炔-3-酮(39.4克)。
ii)室温下将吡啶(215毫升)和乙酸酐(108毫升)的混合物中前 一步骤获得的产物(38.4克)的溶液搅拌1小时。
将反应混合物倒入水 (1000毫升)中并且又继续搅拌1小时。
将产物萃取到乙酸乙酯中;合 并的有机相用水和盐水洗涤,硫酸钠干燥并且减压浓缩,得到 (7α,17α)-17-羟基-7-[3-(乙酰氧基)丙基]-19-去甲孕甾-4-烯-20- 炔-3-酮(40.5克)。
该产物不用进一步纯化就在下面的步骤中使用。
iii)根据类似于实施例1中iv中描述的方法,将前一步骤获得的 产物(40.5克)转化为(7α)-7-[3-(乙酰氧基)丙基]-雌甾-4-烯-3,17- 二酮(39.0克)。
iv)根据类似于实施例1中v中描述的方法,将前一步骤获得的产 物(39.0克)转化为(7α)-7-[3-(乙酰氧基)丙基]-3-羟基雌甾 -1,3,5(10)-三烯-17-酮(36.8克)。
v)根据类似于实施例1中vi中描述的方法,将前一步骤获得的 产物(36.8克)转化为(7α)-7-[3-(乙酰氧基)丙基]-3-甲氧基雌甾 -1,3,5(10)-三烯-17-酮(19.3克)。
vi)根据类似于实施例2中v中描述的方法,将前一步骤获得的产 物(19.3克)转化为(7α)-7-[3-(乙酰氧基)丙基]-3-甲氧基雌甾 -1,3,5(10)-三烯-17-酮缩环1,2-乙二醇(21.8克)。
vii)向无水四氢呋喃(448毫升)中氢化铝锂(6.58克)的悬浮液滴 加无水四氢呋喃(224毫升)中前一步骤获得的产物(21.8克)的溶液, 冷却到0℃。
搅拌1小时后,通过加入饱和的硫酸钠水溶液中止反应。
加入乙酸乙酯,混合物经代卡利特过滤。
减压浓缩滤液,得到 (7α)-7-[3-羟基丙基]-3-甲氧基雌甾-1,3,5(10)-三烯-17-酮缩环 1,2-乙二醇(18.9克)。
该产物不用进一步纯化就在下面的步骤中使 用。
viii)向无水二甲氧基乙烷(80毫升)和乙二醇(28毫升)的混合 物中的吡啶鎓三溴化物(35.9克)的溶液滴加无水二甲氧基乙烷(80毫 升)中前一步骤获得的产物(18.7克)的溶液.同时避免温度超过室温。
搅拌1小时之后将混合物倒入水(159毫升)中硫代硫酸钠(27.1克)的 溶液中,并且将产物萃取到乙酸乙酯中。
合并的有机相用水,饱和的碳 酸氢钠水溶液和盐水洗涤,硫酸钠干燥并减压浓缩,得到 (7α,16α)-16-溴-7-[3-羟基丙基]-3-甲氧基雌甾-1,3,5(10)-三烯 -17-酮缩环1,2-乙二醇(24.3克)。
该产物不用进一步纯化就在下面的 步骤中使用。
ix)根据类似于实施例2中vii中描述的方法,将前一步骤获得的 产物(24.3克)转化为(7α)-7-[3-羟基丙基]-3-甲氧基雌甾 -1,3,5(10),15-四烯-17-酮缩环1,2-乙二醇(13.1克)。
x)根据类似于实施例2中viii中描述的方法,将前一步骤获得 的产物(5.46克)转化为(7α)-7-[3-羟基丙基]-3-甲氧基雌甾 -1,3,5(10),15-四烯-17-酮(5.01克)。
xi)将乙酸异丙烯酯(94毫升)中前一步骤获得的酮(3.19克)和 对甲苯磺酸吡啶鎓(0.94克)的溶液在回流下加热1.5小时。
冷却后, 将反应混合物倒入饱和的碳酸氢钠水溶液中。
将产物萃取到二乙醚中; 合并的有机相用盐水洗涤,硫酸钠干燥并减压浓缩,得到乙酸 (7α)-7-[3-(乙酰氧基)丙基]-3-甲氧基雌甾-1,3,5(10),14,16-五烯 -17-酯(24.3克)。
该产物不用进一步纯化就在下面的步骤中使用。
xii)根据类似于实施例2中x中描述的方法,将前一步骤获得的产 物(3.69克)转化为(7α,17β)-7-[3-(乙酰氧基)丙基]-3-甲氧基雌甾 -1,3,5(10),14-四烯-17-醇(2.49克)。
xiii)用叔丁基二甲基甲硅烷基氯(1.46克)处理无水二氯甲烷 (13毫升)中的前一步骤获得的醇(2.49克)和咪唑(2.20克)的溶液。
室温下搅拌2小时后将反应混合物倒入饱和的碳酸氢钠水溶液中。
将 产物萃取到二乙醚中;合并的有机相用水和盐水洗涤,硫酸钠干燥并 减压浓缩,得到(7α,17β)-7-[3-(乙酰氧基)丙基]-17-[[(1,1-二甲 基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]-3-甲氧基雌甾-1,3,5(10),14-四烯 (3.43克)。
该产物不用进一步纯化就在下面的步骤中使用。
xiv)根据类似于vii中描述的方法,将前一步骤获得的产物(3.43 克)转化为(7α,17β)-17-[[(1,1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧 基]-7-(3-羟基丙基)-3-甲氧基雌甾-1,3,5(10),14-四烯(1.96克)。
xv)向无水二氯甲烷(7.5毫升)中三苯基膦(0.32克)和咪唑 (0.082克)的溶液加入碘(0.292克)。
碘反应完全之后,加入无水二氯 甲烷(3毫升)中前一步骤获得的产物(0.25克)的溶液,室温下将混合 物搅拌30分钟。
然后将其倒入饱和的硫代硫酸钠水溶液中,并且将产 物萃取到二乙醚中;合并的有机相用水,饱和的碳酸氢钠水溶液和盐 水洗涤,硫酸钠干燥并减压浓缩,柱层析得到(7α,17β)-17-[[(1,1- 二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]-7-(3-碘丙基)-3-甲氧基雌甾 -1,3,5(10),14-四烯(0.29克)。
xvi)用叔丁醇钾(1.62克)处理二甲亚砜(5毫升)中前一步骤获得 的碘代物(0.17克)的溶液,并且将反应混合物在室温下搅拌1小时。
将混合物倒入饱和的氯化铵水溶液中,并且将产物萃取到二乙醚中; 合并的有机相用水和盐水洗涤,硫酸钠干燥并减压浓缩,柱层析得到 (7α,17β)-3-甲氧基-7-(2-丙烯基)雌甾-1,3,5(10),14-四烯-17-醇 (0.075克)。
xvii)向回流的液氨(30毫升)中的锂(0.42克)溶液加入无水四 氢呋喃(5毫升)中前一步骤获得的醇(0.15克)。
-40℃下搅拌1小时之 后加入叔丁醇(4毫升,并且继续搅拌30分钟)。
加入乙醇(8毫升)并且 使氨蒸发。
将混合物倒入水中并且将产物萃取到乙酸乙酯中。
合并的 有机相用盐水洗涤,硫酸钠干燥并且减压浓缩,得到(7α,17β)-3-甲 氧基-7-(2-丙烯基)雌甾-2,5(10),14-三烯-17-醇和(7α,17β)-3-甲 氧基-7-丙基)雌甾-2,5(10),14-三烯-17-醇的混合物(0.144克,比 例2∶3)。
xviii)根据类似于实施例1中iii中描述的方法,将前一步骤获 得的产物(0.144克)水解,在柱层析和制备HPLC(反相)之后得到 (7α,17β)-17-羟基-7-(2-丙烯基)雌甾-4,14-二烯-3-酮(0.018 克),[α]D20=+6.2°(c=0.89,二噁烷)。
实施例5 (7α,17β)-7-丁基-17-羟基雌甾-4,14-二烯-3-酮(a)和 (7α,17β)-7-(3-丁烯基)-17-羟基雌甾-4,14-二烯-3-酮(b) i)根据类似于实施例2中iv中描述的方法,将 (7α,17β)-17-[[(1,1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]-7-(3-羟 基丙基)-3-甲氧基雌甾-1,3,5(10),14-四烯(实施例4,步骤xiv;0.40 克)转化为3-[(7α,17β)-17-[[(1,1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]) 氧基]-3-甲氧基雌甾-1,3,5(10),14-四烯-7-基)丙醛(0.40克)。
ii)回流下将甲基三苯基溴化磷鎓(0.94克),叔丁醇钾(0.26克) 和无水甲苯(10毫升)加热1小时。
加入无水甲苯(5毫升)中前一步骤 获得的醛(0.40克)溶液,并且又继续加热1小时,冷却后,将反应混合 物倒入饱和的氯化铵水溶液中,将产物萃取到乙酸乙酯中;合并的有机 相用盐水洗涤,硫酸钠干燥并且减压浓缩,柱层析得到 (7α,17β)-7-(3-丁烯基)-17-[[(1,1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基] 氧基]-3-甲氧基雌甾-1,3,5(10),14-四烯(0.40克)。
iii)根据类似于实施例1中iii中描述的方法,将前一步骤获得的 产物(0.40克)转化为(7α,17β)-17-(3-丁烯基)-3-甲氧基雌甾 -1,3,5(10),14-四烯-17-醇(0.39克)。
iv)根据类似于实施例4中xvii中描述的方法,将前一步骤获得 的产物(0.39克)转化为(7α,17β)-7-丁基-3-甲氧基雌甾 -2,5(10),14-三烯-17-醇和(7α,17β)-7-(3-丁烯基)-3-甲氧基雌甾 -2,5(10),14-三烯-17-醇的混合物(0.37克,比例3∶1)。
v)根据类似于实施例1中iii中描述的方法,将前一步骤获得的 产物(0.37克)水解,在柱层析和制备HPLC(反相)之后得到 (7α,17β)-7-丁基-17-羟基雌甾-4,14-二烯-3-酮(0.043 克),[α]D20=+7.6°(c=0.185,二噁烷),和(7α,17β)-7-(3-丁烯基)-17- 羟基雌甾-4,14-二烯-3-酮(0.077克),[α]D20=+4.4°(c=0.475,二噁 烷)。
实施例6 (7α,17β)-7,13-二乙基-17-羟基甾-4,14-二烯-3-酮 i)在乙醇(600毫升),二噁烷(800毫升)和原甲酸三乙酯(199毫 升)的混合物中13-乙基甾-4-烯-3,17-二酮[Hoffmann-La Roche and Co.;AG,DE1806410(1967);100克]的溶液加入对甲苯磺酸吡啶鎓(5.0 克)。
室温下搅拌4.5小时后加入吡啶(100毫升),并且将该反应混合 物倒入饱和的碳酸氢钠水溶液中。
将产物萃取到乙酸乙酯中;合并的有 机相用水和盐水洗涤,硫酸镁干燥并且减压浓缩,得到3-乙氧基-13- 乙基甾-3,5-二烯-17-酮(146.3克)。
该产物不用进一步纯化就在下 面的步骤中使用。
ii)根据类似于实施例4中vii中描述的方法,将前一步骤获得的 产物(73.2克)转化为(17β)-3-乙氧基-13-乙基甾-3,5-二烯-17-醇 (58.0克)。
iii)向乙醇(525毫升)和水(60毫升)的混合物中的四氯-1,4-苯 并醌(49.6克)的悬浮液加入含有吡啶(2.5毫升)的四氢呋喃(215毫升) 中的前一步骤获得的产物(58.0克)的溶液。
室温下将反应混合物搅拌 4.5小时,然后用水(385毫升)中亚硫酸氢钠(26.7克)的溶液处理。
搅 拌30分钟之后,加入饱和的亚硫酸钠水溶液,并且将产物萃取到乙酸 乙酯中;合并的有机相用饱和的亚硫酸钠水溶液,水和盐水洗涤,硫酸 镁干燥并且减压浓缩,得到棕色油状物(81.0克)。
用57.0克3,5-二烯 重复处理,得到79.0克粗产物。
将合并的粗产物进行柱层析,得到 (17β)-3-乙基-17-羟基甾-4,6-二烯-3-酮(56.3克)。
iv)根据类似于实施例4中xiii中描述的方法,将前一步骤得到 的产物(56.3克)转化为17β-17-[[(1,1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基] 氧基]-13-乙基甾-4,6-二烯-3-酮(65.6克)。
v)根据类似于实施例2中i中描述的方法,使用乙基溴化镁,将 前一步骤得到的产物(25.0克)转化为(7α,17β)-7,13-二乙基-17-羟 基甾-4-烯-3-酮(8.13克)。
vi)根据类似于实施例2中iii中描述的方法,将前一步骤得到的 产物(8.24克)转化为(7α,17β)-7,13-二乙基-3-甲氧基甾 -1,3,5(10)-三烯-17-醇(6.28克)。
vii)根据类似于实施例2中iv中描述的方法,将前一步骤得到的 产物(5.72克)转化为(7α)-7,13-二乙基-3-甲氧基甾-1,3,5(10)-三 烯-17-酮(5.61克)。
viii)根据类似于实施例2中v中描述的方法,将前一步骤得到 的产物(5.61克)转化为(7α)-7,13-二乙基-3-甲氧基甾-1,3,5(10)- 三烯-17-酮环醛缩1,2-乙二醇(6.99克)。
ix)根据类似于实施例2中vi中描述的方法,将前一步骤得到的 产物(6.27克)转化为(7α,16α)-16-溴-7,13-二乙基-3-甲氧基甾 -1,3,5(10)-三烯-17-酮环醛缩1,2-乙二醇(8.47克)。
x)根据类似于实施例2中vii中描述的方法,将前一步骤得到的 产物(8.47克)转化为(7α)-7,13-二乙基-3-甲氧基甾-1,3,5(10),15- 四烯-17-酮环醛缩1,2-乙二醇(5.21克)。
xi)用对甲苯磺酸吡啶鎓(3.18克)处理无水甲苯(120毫升)中前 一步骤得到的产物(4.61克)的溶液并且回流下加热1小时。
冷却后, 将反应混合物倒入碳酸氢钠水溶液中并且将产物提取到乙酸乙酯中。
合并的有机相用水和盐水洗涤,硫酸镁干燥并且减压浓缩,得到 (7α)-7,13-二乙基-3-甲氧基甾-1,3,5(10),14-四烯-17-酮环醛缩 1,2-乙二醇(4.44克)。
该产物不用进一步纯化就在下面的步骤中使 用。
xii)用对甲苯磺酸(2.29克)处理无水甲苯(120毫升)中前一步 骤得到的产物(4.44克)的溶液并且回流下加热45分钟。
冷却后,将反 应混合物倒入碳酸氢钠水溶液中并且将产物提取到乙酸乙酯中。
合并 的有机相用水和盐水洗涤,硫酸镁干燥并且减压浓缩,得到(7α)-7,13- 二乙基-3-甲氧基甾-1,3,5(10),14-四烯-17-酮(3.89克)。
该产物不 用进一步纯化就在下面的步骤中使用。
xiii)根据类似于实施例4中vii中描述的方法,将前一步骤得 到的产物(3.89克)转化为(7α,17β)-7,13-二乙基-3-甲氧基甾 -1,3,5(10),14-四烯-17-醇(2.79克)。
xiv)根据类似于实施例4中xvii中描述的方法,将前一步骤得到 的产物(2.0克)转化为(7α,17β)-7,13-二乙基-3-甲氧基甾 -2,5(10),14-三烯-17-醇(1.77克)。
xv)根据类似于实施例1中iii中描述的方法,将前一步骤得到的 产物(1.77克)转化为(7α,17β)-7,13-二乙基-17-羟基甾-4,14-二烯 -3-酮(0.367克),m.p.181.5-183.5℃。
实施例7 (7α,17β)-7-乙烯基-13-乙基-17-羟基甾-4,14-二烯-3-酮 i)根据类似于实施例2中i中描述的方法,将 (17β)-17-[[(1,1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]-13-乙基甾 -4,6-二烯-3-酮(实施例6,步骤iv;25.0克)转化为(7α,17β)-7-乙烯 基-13-乙基-17-羟基甾-4-烯-3-酮(8.20克)。
ii)根据类似于实施例2中iii中描述的方法,将前一步骤得到的 产物(7.76克)转化为(7α,17β)-7-乙烯基-13-乙基-3-甲氧基甾 -1,3,5(10)-三烯-17-醇(5.16克)。
iii)根据类似于实施例2中iv中描述的方法,将前一步骤得到的 产物(5.43克)转化为(7α)-7-乙烯基-13-乙基-3-甲氧基甾 -1,3,5(10)-三烯-17-酮(5.08克)。
iv)根据类似于实施例2中v中描述的方法,将前一步骤得到的产 物(4.92克)转化为(7α)-7-乙烯基-13-乙基-3-甲氧基甾-1,3,5(10)- 三烯-17-酮环醛缩1,2-乙二醇(5.42克)。
v)根据类似于实施例2中vi中描述的方法,将前一步骤得到的 产物(5.08克)转化为(7α,16α)-16-溴-7-乙烯基-13-乙基-3-甲氧基 甾-1,3,5(10)-三烯-17-酮环醛缩1,2-乙二醇(7.41克)。
vi)根据类似于实施例2中vii中描述的方法,将前一步骤得到的 产物(7.41克)转化为(7α)-7-乙烯基-13-乙基-3-甲氧基甾 -1,3,5(10),15-四烯-17-酮环醛缩1,2-乙二醇(3.87克)。
vii)根据类似于实施例6中xi中描述的方法,将前一步骤得到的 产物(3.42克)转化为(7α)-7-乙烯基-13-乙基-3-甲氧基甾 -1,3,5(10),14-四烯-17-酮环醛缩1,2-乙二醇(3.30克)。
viii)根据类似于实施例6中xii中描述的方法,将前一步骤得 到的产物(3.30克)转化为(7α)-7-乙烯基-13-乙基-3-甲氧基甾 -1,3,5(10),14-四烯-17-酮(3.0克)。
ix)根据类似于实施例4中vii中描述的方法,将前一步骤得到的 产物(3.00克)转化为(7α,17β)-7-乙烯基-13-乙基-3-甲氧基甾 -1,3,5(10),14-四烯-17-醇(1.70克)。
x)根据类似于实施例4中xvii中描述的方法,将前一步骤得到 的产物(1.49克)转化为(7α,17β)-7-乙烯基-13-乙基-3-甲氧基甾 -2,5(10),14-三烯-17-醇(1.60克)。
xi)根据类似于实施例1中iii中描述的方法,将前一步骤得到的 产物(1.60克)转化为(7α,17β)-7-乙烯基-13-乙基-17-羟基甾-4,14- 二烯-3-酮(0.47克),m.p.141-145℃。
实施例8 (3β,7α,17β)-7-乙基雌甾-4,14-二烯-3,17-二醇 根据类似于实施例4中vii中描述的方法,从(7α,17β)-7-乙基 -17-羟基雌甾-4,14-二烯-3-酮(实施例1a)制备标题化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ5.39(m,1H),5.01(m,1H),4.21(m,1H),3.96(m,1H), 0.98(s,3H),0.87(t,3H,J=7.6Hz)。
实施例9 (5α,7α,17β)-7-乙基-17-羟基雌甾-14-烯-3-酮 向回流的液氨(44毫升)中的锂(0.31克)溶液加入无水四氢呋喃 (13毫升)中(7α,17β)-7-乙基-17-羟基雌甾-4,14-二烯-3-酮(实施 例1a;0.67克)溶液。
-40℃下搅拌30分钟之后加入固体氯化铵并且使 氨蒸发。
加入水并且将产物萃取到乙酸乙酯中。
合并的有机相用饱和 的氯化铵水溶液和盐水洗涤,硫酸钠干燥并且减压浓缩,柱层析得到 (5α,7α,17β)-7-乙基-17-羟基雌甾-14-烯-3-酮(0.21克)。
1H-NMR(CDCl3)δ5.02(s,1H),3.98(t,1H,J=8.4Hz),0.99(s,3H), 0.89(t,3H,J=7.5Hz)。
实施例10 LH抑制测定:测定口服活性 与Segaloff化合物相比,对成熟雄性阉割大鼠模型测定几种本发 明的雄激素的体内效价(po)。
该模型血清LH高(比完整大鼠高50倍,由于不存在睾丸睾酮副反 馈)。
每天用本发明给定化合物的花生油悬浮液po处理这些大鼠4天。
给药之前和最后口服给药之后3小时通过尾静脉采集血液并且测定血 清LH。
以抑制血清LH50%(±10%)的雄激素的量(毫克/毫升)表示雄激 素的效价(po)(ED50)。
使用在室内配制的试剂在室中进行大鼠LH时间-分辨免疫荧光测 定(TR-IFMA),单克隆捕获抗体定向抗人绒毛膜促性腺激素(hCG,其与 大鼠β-亚基起交叉反应)的β-亚基和生物素标记的检测抗体(兔多克 隆抗体定向抗重组大鼠LH的亚基)。
根据Hakola等(1997)描述的方法 制备重组大鼠LH。
在两点-IFMA中,通过与链霉抗生物素蛋白-铕最后 孵育只测定完整大鼠LH。
IFMA中的测定以相对长激发期中镧铕的荧 光。
大鼠LH标准物的浓度范围是0.001-10ng/毫升,对于血清LH的最 精确测定,用测定缓冲液[Hakola,K.Boogaart,P.V.Mulders,J.,de Leeuw,R.,Schoonen,W.,Heyst,J.V.,Swolfs,A.,Casteren,J.V.,Huh taniemi,I.,和Kloosterboer,H.J.,重组大鼠黄体生成素;通过中国 仓鼠卵巢细胞生产,纯化和功能表征,分子和内分泌学 (Molecular&Cellular Endocrinology)128,47(1997)]将血清样品稀 释8倍。
结论 表.抑制血清LH50%(±10%)需要的本发明雄激素的(ED50)(po)。
    实施例
    ED50(毫克/千克)
    1a
    0.2
    2
    0.5
    Segaloff化合物*
    5
*(7α,17β)-7-甲基-17-羟基雌甾-1,4-二烯-3-酮 实施例11 与人肝细胞孵育之后本发明的雄激素的t1/2的测定 作为与人肝细胞接触的结果的化合物的半寿期是代谢稳定性的可 靠指征。
因为该类甾族化合物的吸收高这一点是公知的,该测定提供了 测定对人的口服活性的体外模型。
要明白半寿期越短表明化合物代谢 越快,或者反之亦然,半寿期越长,当口服施药时化合物表现出的对人 体的效果越好。
在液氮中低温保存从健康年轻(25-45岁)男性器官捐献者获得的 肝细胞,并且在使用之前一直保存。
在37℃下在水域中解冻,立即置于 冰上,在一体积冷的(4℃)孵育培养基中洗涤两次[William’s培养基 E(没有酚红),有Glutamax I§,庆大霉素50微克/毫升,胰岛素1μM, 氢化可的松半琥珀酰酯10μM,胎牛血清0%(v/v)],计数,并且通过锥 虫蓝排斥检测生存力。
在37℃下用空气/O2/CO2混合物(55/40/5)在1.5 毫升培养基中以0.5×106细胞/孔的标称密度在12孔(没有包被)板上 培养作为悬浮液的细胞。
将平板放置于以大约10rpm转动的定轨振荡 器中。
肝细胞与10nM终浓度的要测定的化合物孵育。
0.5,1和3小时之 后,通过将全部孵育混合物移至冰上玻璃管中并且加入1体积丙酮而 中止孵育。
室温下通入氮气流干燥丙酮,将体积调节至1.5毫升,并且 将试管在4℃下以10000Xg离心30分钟。
收集去蛋白质化上清液用于 LC-MS/MS分析。
结论 表.与人肝细胞孵育之后本发明的雄激素的t1/2     实施例
    t1/2(分钟)
    1a
    157
    2
    40
    Segaloff化合物*
    60
*(7α,17β)-7-甲基-17-羟基雌甾-1,4-二烯-3-酮 展开

查看更多专利详情信息请先登录或注册会员

相关专利类别推荐

获取手机验证码,即可注册成为会员

专利详情咨询

咨询内容

姓名

手机

验证码

用户登录

手机号

手机验证码

提示

不能再减了!!!

提交成功

八月瓜客服中心已经收到您的信息,正在为您派遣知识产权顾问。知识产权顾问会携带贴心的服务以闪电搬的速度与您联系。

扫一扫关注八月瓜微信 创业一手掌握